熊本県道335号湯前人吉自転車道線（くまもとけんどう335ごう ゆのまえひとよしじてんしゃどうせん）は、熊本県球磨郡湯前町から人吉市に至る一般県道（自転車専用道路）である。球磨川サイクリングロードの愛称が付けられている。球磨郡錦町から人吉市にかけては、自転車専用でない区間も含まれている。また、人吉市七地町から麓町にかけての区間が未開通となっている。

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